EST:表达序列标签,expressed sequence tags 。
顾名思义,很好理解,就是表达出来的序列,即从基因组DNA上表达出来的RNA,但是我们没法测序RNA,所以我们最终测的是表达序列的cDNA片段。
“标签”:就是指这些序列可能比较短,但是可以用来标定一个物种。
常见下载方式有两种:
1. NCBI Web下载
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/dbEST/
打开,搜索你要的物种,比如 Camellia ,可以看到结果EST (50287)。
Web下载几个还行,想要批量下载就有点费力了,ncbi反爬虫,也不好爬。
2. NCBI ftp下载
ftp://ftp.ncbi.nih.gov/repository/dbEST/
直接wget就可以批量下载了。
for one in `seq 1 81` do echo $one wget ftp://ftp.ncbi.nih.gov/repository/dbEST/dbEST.reports.000000.${one}.gz done
下载后的文件格式是:
IDENTIFIERS dbEST Id: 5 EST name: EST00006 GenBank Acc: M61958 GDB Dsegment: D0S2525E CLONE INFO Clone Id: HHCSB86 Source: ATCC Id in host: 77063 DNA type: cDNA PRIMERS Sequencing: M13 Forward PolyA Tail: Unknown SEQUENCE TGCACAACCAAGTTTTGTGACTACGGGAAGGCTCCCGGGGCAGAGGAGTACGCTCAACAA GATGTGTTAAAGAAATCTTACTCCAAGGCCTTCACGCTGACCATCTCTGCCCTCTTTGTG ACACCCAAGACGACTGGGGCCCNGGTGGAGTTAAGCGAGCAGCAACTNCAGTTGTNGCCG AGTGATGTGGACAAGCTGTCACCCACTGACA Entry Created: May 26 1992 Last Updated: Dec 18 2012 PUTATIVE ID Assigned by submitter 2',3'-cyclic nucleotide phoshodiesterase LIBRARY Id: LIBEST_000004 Lib Name: LIBEST_000004 Hippocampus, Stratagene (cat. #936205) Organism: Homo sapiens Vector: lambdaZAP-II Description: Female, 2 years; oligo-dT + random primed cDNA synthesis;
信息是挺全面的,自己想要哪个物种就只能自己提取了。
提取成FASTA的脚本我就不贴了(效率很重要,因为文件很大)。
最后我还是自己写了个脚本,biopython实在是太慢了。
import gzip inf = gzip.open("dbEST.reports.000000.49.gz","rb") raw_id = "" seq = "" for line in inf: if line.stratswith("GenBank Acc"): id = line.split(":")[1].strip() if line.stratswith("SEQUENCE"): seq = "" while True: rline = inf.readline() seq+=rline.strip() if not line.stratswith(" "): break if line.stratswith("Organism"): organism = line.split(":")[1].strip() if organism.startswith("Camellia"): print(">"+id+" "+organism, seq, sep=" ")
我的脚本可以用,但是不一定很快。
我用awk试了很久,没有成功。
2018年3月16日