• some transcripts quantification brief comprehensions


     

    Some biases in the standard rnaseq analysis

     有参拼接:Stringtie 、 Cufflinks and Traph

    flow network algorithm : maximal and minimal methods respectively

     无参组装:Trinity

    clustering by K-mers

    salmon: as for now the best performance software 

    DAG:有向无环图 

    bagging是减少variance,而boosting是减少bias

     

    High variance 是model过于复杂overfit,记住太多细节noise,受outlier影响很大;high bias是underfit,model过于简单,cost function不够好。
    A- bagging随机选取data的subset,outlier因为比例比较低,参与model training的几率也比较低,所以bagging降低了outliers和noise对model的影响,所以降低了variance。
    B-boosting参zh Bright的答案,minimize loss function by definition minimize bias.
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    Streaming fragment assignment for real-time analysis of sequencing experiments

    流形碎片的实时测序实验

    TIPS:

    在估计丰度时候很容易用错或者是正确使用与否是很关键的一步:

    RPKM:Reads Per Kilobase of exon modelper Million mapped reads (每千个碱基的转录每百万映射读取的reads),主要用来对单端测序(single-end RNA-seq)进行定量的方法。
    RPKM= total exon reads/ (mapped reads (Millions) * exon length(KB))

    FPKM:

    Fragments Per Kilobase of exon model per Million mapped fragments(每千个碱基的转录每百万映射读取的fragments),主要是针对pair-end测序表达量进行计算

    TPM:

    Transcripts Per Kilobase of exonmodel per Million mapped reads (每千个碱基的转录每百万映射读取的Transcripts),优化的RPKM计算方法,可以用于同一物种不同组织的比较。
    TPM (推荐软件,RSEM) 的计算公式:

    TPMi={( Ni/Li )*1000000 } / sum( Ni/Li+……..+ Nm/Lm )

    CPM/RPM:

    Reads/Counts of exon model per Million mapped reads (每百万映射读取的reads).
    RPM的计算公式:
    RPM=total exon reads / mapped reads (Millions)

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