8岁男童成为美国首位接受基因治疗的杜氏进行性肌营养不良患者
出自中国肌萎缩网论坛 美国首次用基因疗法治疗杜氏进行性肌营养不良的针对患者的临床实验正式开始。经过美国北卡罗莱纳大学Chapel Hill's医学院和美国匹斯堡大学科学家历经20年的努力研究，旨在论证基因疗法对杜氏进行性肌营养不良患者进行治疗的安全性和有效性的针对患者的临床试验，已于2006年3月28日在美国附属于俄亥俄州立大学的哥伦比亚儿童医院正式拉开序幕。
研究者招募了六位杜氏进行性肌营养不良患者，将通过基因载体将外源的抗肌萎缩蛋白基因注射入这些杜氏进行性肌营养不良的肌肉组织（注：由于抗肌萎缩蛋白基因是人染色体上最大的基因，无法完全装入用于基因递送的腺相关病毒，所以这次被送入的抗肌萎缩蛋白基因，是经由美国匹斯堡大学华裔科学家XIAO XIAO领导的研究小组，研制的截短的，但仍然能维持最基本功能的抗肌萎缩蛋白。这一小型化的抗肌萎缩蛋白基因，在对DMD实验鼠的实验中，显示了良好的效果。）
每个接受临床试验的的杜氏进行性肌营养不良患者一条手臂的肱二头肌将被注射入外源的截短的抗肌萎缩蛋白基因，而另一条手臂的肱二头肌将被注射入用于进行对照的安慰剂，无论是研究者还是受试者都不知道患者的哪条手臂被注射了外源的抗肌萎缩蛋白基因，注射后的几个星期，将在显微镜下对被注射外源的抗肌萎缩蛋白的肌肉组织进行分析，同时还将进行一系列的身体和患者肌肉力量的测试，以便观察这一基因疗法对杜氏进行性肌营养不良患者是否是安全的和外源的微型抗肌萎缩蛋白是否能在杜氏进行性肌营养不良患者的肌肉细胞中持续地表达抗肌萎缩蛋白。
杜氏进行性肌营养不良是由于患者的抗肌萎缩蛋白基因发生突变引起的，表现的症状是患者的肌肉组织呈进行性的萎缩退化，随着时间的推移患者的肌肉力量不断减弱，在显微镜下能清楚的观察到杜氏进行性肌营养不良患者肌肉组织的改变。杜氏进行性肌营养不良起病于幼年期，大多数患者会30岁以前因心力衰竭或呼吸肌麻痹而死亡。杜氏进行性肌营养不良患者的基因缺陷发生在X染色体上，是一种伴性隐性遗传，所以绝大多数的患者都是男性。
目前的药物治疗最多只能使杜氏进行性肌营养不良患者肌肉组织退化的速度略微减缓。抗肌萎缩蛋白基因是人体最大的基因，使抗肌萎缩蛋白基因小型化，并且使其拥有相当部分的功能，是目前基因治疗领域的最大的挑战。
这次开展的最新的抗肌萎缩蛋白基因疗法结合了两项最先进的技术，包括使外源的抗肌萎缩蛋白基因小型化和用纳米生物材料进行纳米级的基因递送，后者是腺相关病毒载体的进一步发展，这些特制的生物纳米材料是被设计用来专门递送微型的抗肌萎缩蛋白基因的。
这次基因治疗杜氏进行性肌营养不良的患者临床试验得以实施，是与美国北卡罗莱纳大学药理学教授和北卡大学基因治疗研究中心主任Samulski和他的学生，原北卡罗莱纳大学的博士后，目前美国美国匹斯堡大学人类基因治疗中心和整形外科副教授，华裔科学家XIAO XIAO对此的贡献分不开的。
Samulski是研究进行基因递送的病毒载体的权威，他在上世纪80年代毕业于美国佛罗里达大学，当时他写的毕业论文就是用腺相关病毒作为基因载体来进行基因治疗。Samulski分离出的腺相关病毒2，目前已经被用于襄性纤维化和其他疾病的基因治疗临床试验
1986年Samulski来到匹斯堡大学，成为生物学系的副教授并且拥有了自己的实验室，他带的第一个研究生就是来自中国湖北的XIAO XIAO，XIAO XIAO毕业后与Samulski 经常进行合作研究。
1993年Samulski来到美国北卡罗莱纳大学，成为该大学新的基因治疗研究中心的主任。XIAO XIAO毕业后，先是进入了企业界，然后来到北卡罗莱纳大学Samulski的基因治疗研究中心从事博士后研究。1996年Samulski的研究小组，报告了他们首次用腺相关病毒递送抗肌萎缩蛋白基因进行杜氏进行性肌营养不良实验鼠肌肉细胞中的成功实验。1998年XIAO XIAO又回到了匹斯堡大学，在那里他继续进行肌肉生物学的研究，但是重点已经放在怎样将过大的抗肌萎缩蛋白基因装入腺相关病毒，而他昔日的导师还在继续对腺相关病毒载体进行更加深入的研究。
XIAO XIAO 在匹斯堡大学开发了微型版的抗肌萎缩蛋白，并渴望用基因载体对这一微型的抗肌萎缩蛋白基因进行试验，于是他又于昔日的恩师进行了联系。Samulski说：“抗肌萎缩蛋白就像一个带有桩子的篱笆，他是人体最大的基因，大约占X染色体的1%，XIAO XIAO拔了钉，拆了桩，使得篱笆变得越来越小，同时还要使其保持一定的功能。XIAO XIAO研制了微型版的抗肌萎缩蛋白，并开始寻找进行基因递送的方法。而当时我们已使得我们研制的基因载体，在治疗一种因酶缺陷引起的疾病—Canavan's基因治疗中达到了临床级的水平，当时美国食品和药品管理局已经批准了我们用腺相关病毒基因载体将基因物质送入Canavan's病患者的脑组织中，可以我们的研究已经走上了轨道。XIAO XIAO想知道我们北卡大学基因载体的研究已达到了怎样的水平，我告诉他，我们的基因载体已被应用于Canavan's病的基因治疗临床前实验，并在不断改进，我们正在研究一些适合于进行肌肉组织基因治疗的腺相关病毒载体。”
于是这对师生又开始了紧密的合作，并于2003年合作建立了一家名为Asklepios的生物制药公司，该公司拥有Samulski的腺相关病毒和Xiao的微型版抗肌萎缩蛋白基因的专利。2004年7月美国神经肌肉疾病协会出资160万美元资助该公司所从事的基因治疗杜氏进行性肌营养不良的研究。然后美国俄亥俄大学医学院神经学、小儿科学和病理学教授，美国神经肌肉疾病协会哥伦比亚儿童医院诊所的负责人，哥伦比亚儿童医院神经肌肉疾病研究中心主任Mendell也加入了他们的团队，这次基因治疗将在哥伦比亚儿童医院美国神经肌肉疾病协会诊所进行，Mendell将负责这次临床试验的具体实施Mendell（Mendell是一位出色的临床医生）。
在按照美国食品和药品管理局的要求进行了毒性试验后，证明这种微型抗肌萎缩蛋白的基因治疗是无害的，同时最终能够使杜氏进行性肌营养不良患者获益。美国食品药品管理局于2006年3月3日批准了这项临床实验，这是美国第一次对杜氏进行性肌营养不良患者进行基因治疗的临床试验。
主要的研究者Samulski说：“经过了多年的艰苦的临床前的研究，今天我感到很兴奋，我们终于将这一项能够使杜氏进行性肌营养不良患者受益的研究带入了临床试验，我对这次临床试验充满了信心。”
对杜氏进行性肌营养不良患者进行的基因治疗临床试验3月29日在美国俄亥俄州立大学所属的哥伦比亚儿童医院正式进行。从某种意义上说：前沿医学发展的命运，紧紧地掌握在一个八男孩的手中。星期一，一位名叫安德鲁·克巴格的八岁的美国男孩，在两位摄影记者的陪同下，挂号进入美国俄亥俄州立大学所属的哥伦比亚儿童医院。其中一位记者不断地告诫安德鲁要镇静，不要害怕，真诚地希望他能微笑地面对这一次历史性的基因注射。但是八岁的安德鲁做不到，他头低垂着，下巴有些僵硬，眉头紧锁，反复地挤压手掌，发出咆哮声。
昨天经过美国神经肌肉疾病协会一系列采访和录音，安德鲁成为美国第一位接受基因治疗的杜氏进行性肌营养不良患者，这次基因治疗的目的是为了恢复杜氏进行性肌营养不良患者的肌肉组织，杜氏进行性肌营养不良是一种致命性的进行性肌营养不良，目前没有有效的治疗方法。
俄亥俄大学附属的哥伦比亚儿童医院神经病专家吉瑞·蒙代尔将一种由基因载体和截短的抗肌萎缩蛋白基因混合的，被称为Biostrophin的制剂，分三次注射到安德鲁的一条手臂，又在安德鲁另一条手臂上注射了三次用作对照的安慰剂。杜氏进行性肌营养不良患者的肌肉细胞中缺失了一种叫做抗肌萎缩蛋白蛋白质，使他们的肌肉组织易受到损害，且不易恢复，最终导致患者肌肉组织持续性的退化，坏死，大多数的患者在12岁以前，就会终身与轮椅相伴，30岁以前会因心力衰竭或呼吸肌麻痹而离开人间。基因治疗的目的是用外源的抗肌萎缩蛋白基因，将杜氏进行性肌营养不良患者X染色体上的有缺陷的抗肌萎缩蛋白基因替换掉，这一基因治疗的方法在实验小鼠、大鼠和狗的动物试验中，取得了令人满意的积极效果。这次治疗的目的是改善杜氏进行性肌营养不良患者被注射的肱二头肌的功能，但是不可能完全逆转安德鲁和其他患者肌营养不良的症状（因为使用的不是全长的外源的抗肌萎缩蛋白基因，而是被截短的抗肌萎缩蛋白基因）
星期一中午，在俄亥俄州立大学哥伦比亚儿童医院的餐桌上，Jude Samulski and Jade Samulski 正在描述他们20年来，在实验室中的努力和导致这一基因治疗临床试验的情况，在他们的餐桌上摆放着用于研究的手提式电脑。
Jude Samulski 是Jade Samulski的叔父，他是美国北卡罗莱纳大学的一位病毒学家，二十年前就开始研究用于将外源的基因导入细胞中的基因载体。这种载体是一种经过基因工程改造的病毒，它对人体无害，而且能有效地进入细胞。而他的研究伙伴，也是他昔日的学生，美国匹斯堡大学的一位来自中国湖北的科学家Xiao Xiao长期以来一直在致力于将过大的抗肌萎缩蛋白基因截短，但是必须保持抗肌萎缩蛋白基因上的关键组件，使其能够被装入Jude Samulski研制的腺相关病毒基因载体，这种基因载体只能装下抗肌萎缩蛋白基因的40%。两位科学家各自研究工作的完美结合，导致了这次具有历史意义的基因治疗得以实施。他们还一起成立了一家名为Asklepios的生物制药公司
在Jade Samulski用手提电脑中的另一段录像则显示了一只原先患有类似于杜氏进行性肌营养不良的大鼠，在经过这种基因治疗后，踩单车的速率几乎与正常的大鼠没有什么两样。Jade Samulski说：“当我看到如此美妙的情景后，感到非常兴奋。我们的团队在过去两年多时间里，每周工作七天，每天工作12—15个小时，就是为了看到我们研制的Biostrophin被用于临床对杜氏进行性肌营养不良患者试验的这一天。”
安德鲁是第一位，在未来九个月里将被蒙代尔教授注射Biostrophin的六位8—12岁的杜氏进行性肌营养不良患者。哥伦比亚儿童医院是唯一的被美国食品和药品管理局批准的开展此次临床试验的单位。
接受这次基因治疗的六位杜氏进行性肌营养不良患者，将被严密地观察其身体是否有任何不正常的表现，包括注射点是否有红肿。每位患者在接受治疗后的六个星期，将进行肌肉活组织检查，研究者希望看到被注射入杜氏进行性肌营养不良患者体内的基因在患者血液系统中有较高的含量，特别是在患者的腿部肌肉。
美国俄亥俄州立大学哥伦比亚儿童医院基因治疗研究中心的负责人，这次基因治疗的具体执行者蒙代尔说：“我们希望这一新型的基因治疗的方法，能够改善杜氏进行性肌营养不良患者的生活质量。最终，这一基因治疗的方法，将采用血管注射将治疗的基因送入杜氏进行性肌营养不良患者全身的肌肉组织，包括心肌。”
这一基因治疗的研究由美国神经肌肉疾病协会出资160万美元开展。自从安德鲁的父母麦克和朱丽叶知道自己的儿子患上了不治之症——杜氏进行性肌营养不良后，已经为美国神经肌肉疾病协会筹集了8万美元。如果这次基因治疗的临床试验获得成功，不仅能引来更多的研究资金，而且为杜氏进行性肌营养不良患者治疗提供了美好的前景。安德鲁的母亲说：“我们的首次旅行虽然没有到达月球，但是必须有人走出第一步。”